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谷氨酰胺轉氨酶檢測：原理、應用與標準化實踐

簡介

谷氨酰胺轉氨酶（Alanine Aminotransferase, ALT），又稱丙氨酸氨基轉移酶，是人體內一種重要的代謝酶，廣泛分布于肝臟、腎臟、心肌等組織中，其中以肝細胞內的活性最高。ALT的主要功能是催化丙氨酸與α-酮戊二酸之間的氨基轉移反應，生成丙酮酸和谷氨酸，參與氨基酸代謝與能量循環。當肝細胞因炎癥、壞死或損傷時，ALT會釋放至血液中，導致血清ALT活性顯著升高。因此，ALT檢測被公認為評估肝細胞損傷的敏感指標，在臨床診斷、疾病監測及健康管理中具有重要價值。

檢測項目及簡介

ALT檢測的核心目標是測定血清或血漿中ALT的酶活性水平，通常以單位每升（U/L）表示。檢測項目主要包括以下兩類：

1. 血清ALT活性測定：通過定量分析血清中ALT的催化活性，間接反映肝細胞受損程度。
2. 聯合檢測：常與天冬氨酸氨基轉移酶（AST）、堿性磷酸酶（ALP）等其他肝酶指標聯合檢測，結合AST/ALT比值（De Ritis比值）輔助鑒別肝病類型（如病毒性肝炎與酒精性肝病）。

檢測結果可為急慢性肝炎、藥物性肝損傷、肝硬化等疾病的診斷提供依據，并用于監測治療效果或評估預后。

適用范圍

ALT檢測的臨床應用場景廣泛，主要包括：

1. 肝炎診斷與鑒別：病毒性肝炎（如甲肝、乙肝、丙肝）急性期常伴隨ALT顯著升高；酒精性肝炎或非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）患者也可出現ALT水平異常。
2. 藥物肝毒性監測：長期服用抗結核藥物、化療藥物或他汀類降脂藥的患者需定期檢測ALT，以早期發現藥物性肝損傷。
3. 健康體檢篩查：作為肝功能常規檢查項目，用于無癥狀人群的肝病早期篩查。
4. 慢性肝病管理：對肝硬化、肝癌等慢性肝病患者進行動態監測，評估病情進展。
5. 其他疾病關聯性分析：如心肌梗死、肌肉疾病等非肝臟疾病也可能引起ALT輕度升高，需結合臨床癥狀綜合判斷。

檢測參考標準

為確保檢測結果的準確性與可比性，ALT檢測需遵循國際或國內標準化組織發布的技術規范，主要包括：

1. 國際臨床化學聯合會（IFCC）標準：
   • 標準號：IFCC Primary Reference Procedures
   • 標準名稱：《Measurement of Catalytic Activity of Alanine Aminotransferase at 37°C》 該標準規定了ALT檢測的最適反應條件（如溫度、底物濃度）及方法學驗證要求。
2. 中國衛生行業標準：
   • 標準號：WS/T 404.7-2022
   • 標準名稱：《臨床常用生化檢驗項目參考區間第7部分：血清丙氨酸氨基轉移酶、天門冬氨酸氨基轉移酶、堿性磷酸酶和γ-谷氨酰轉移酶》 該標準明確了健康人群ALT的參考區間（男性：9-50 U/L；女性：7-40 U/L）及檢測方法的技術要求。
3. 美國臨床和實驗室標準協會（CLSI）指南：
   • 標準號：CLSI EP05-A3
   • 標準名稱：《Evaluation of Precision of Quantitative Measurement Procedures》 該指南為實驗室建立ALT檢測的精密度與準確度提供了方法學框架。

檢測方法及相關儀器

ALT檢測方法主要基于酶促反應動力學原理，目前臨床實驗室普遍采用速率法（連續監測法）或終點法（固定時間法）：

1. 速率法

   • 原理：在37℃恒溫條件下，ALT催化L-丙氨酸與α-酮戊二酸反應生成丙酮酸，后者與NADH在乳酸脫氫酶（LDH）作用下轉化為L-乳酸，同時NADH被氧化為NAD+。通過分光光度計在340 nm波長下監測NADH吸光度的下降速率，計算ALT活性。
   • 優勢：操作簡便、靈敏度高，適合自動化分析。

2. 終點法

   • 原理：在反應終止后，通過顯色劑（如2,4-二硝基苯肼）與反應產物酮酸結合生成紅棕色化合物，測定其吸光度以推算ALT活性。
   • 應用場景：適用于不具備連續監測功能的小型實驗室，但精密度略低于速率法。

主要檢測儀器：

• 全自動生化分析儀：如羅氏Cobas系列、貝克曼庫爾特AU系列、西門子ADVIA系列等，可高通量完成ALT檢測，并實現與其他肝功能的聯合分析。
• 分光光度計：用于手動或半自動檢測，需配合恒溫水浴箱及比色杯完成反應體系監測。

結語

ALT檢測作為肝功能評估的基石，其科學性與規范性直接影響臨床決策的準確性。隨著檢驗技術的進步，自動化檢測平臺與標準化試劑的普及顯著提升了檢測效率與結果一致性。未來，結合人工智能算法對ALT動態變化模式的分析，或將為肝病早期預警提供更精準的支持。臨床實踐中，需嚴格遵循標準操作流程，結合患者病史與其他指標綜合解讀檢測結果，以實現個體化診療目標。